注射用盐酸万古霉素（征求意见稿）

Zhusheyong Yansuan Wangumeisu

Vancomycin Hydrochloride for Injection

  

本品为盐酸万古霉素与适宜的赋形剂制成的无菌冻干品，按无水物计算，每1mg的效价不得少于1000万古霉素单位。按平均装量计算，含万古霉素应为标示量的90.0%～115.0%。

【性状】  本品为白色或类白色粉末或疏松块状物。

【鉴别】  (1) 取本品与万古霉素标准品适量，分别以万古霉素B检查项下的流动相A溶解并稀释成每1ml中含0.2mg的溶液，作为供试品溶液与标准品溶液，照万古霉素B检查项下的色谱条件试验，供试品溶液主峰的保留时间应与标准品溶液主峰的保留时间一致。

(2) 本品的水溶液显氯化物的鉴别反应(中国药典2005年版二部附录III)。

【检查】  酸度  取本品，按标示量加水制成每1ml中含5万单位的溶液，依法测定（中国药典2005年版二部附录Ⅵ H），pH值应为2.5～4.5。

溶液的澄清度与颜色  取本品5瓶，分别按标示量加水制成每1ml中含10万单位的溶液，溶液应澄清；如显浑浊，与1号浊度标准液（中国药典2005年版二部附录Ⅸ B）比较，均不得更浓；如显色，依法检查（中国药典2005年版二部附录Ⅸ A第一法），与黄色4号标准比色液比较，均不得更深。

吸光度 取本品适量，按标示量加水制成每1ml中含10万单位的溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2005年版二部附录Ⅳ A），在450nm的波长处测定吸光度，不得过0.10。

万古霉素B与有关物质  照高效液相色谱法(中国药典2005年版二部附录Ⅴ D) 测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以三乙胺缓冲液(取三乙胺4ml，加水至2000ml，用磷酸调节pH至3.2)-乙腈-四氢呋喃(92:7:1)为流动相A，以三乙胺缓冲液-乙腈-四氢呋喃(70:29:1)为流动相B；流速为每分钟1.0ml；检测波长为280nm，线性梯度洗脱。

精密称取本品约10.0mg，置5ml量瓶中，加流动相A溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液(a)；精密量取供试品溶液(a)2ml，置50ml量瓶中，加流动相A稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液(b)。精密量取供试品溶液(b)0.5ml，加流动相A定量稀释至20.0ml，摇匀，作为对照溶液；另取万古霉素标准品适量，加水溶解并制成每1ml中含0.5mg的溶液，在65℃下加热24小时，冷却，作为系统适用性试验溶液，量取20ml注入液相色谱仪，记录的色谱图中两个主峰间的分离度应大于5.0；另取对照溶液20ml注入液相色谱仪，记录的色谱图中主峰的信噪比应大于5.0；另取供试品溶液(b) 20ml注入液相色谱仪，记录色谱图，万古霉素B峰的拖尾因子应小于1.6。

测定法  精密量取供试品溶液(a)、(b)与对照溶液各20ml，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按公式1和公式2分别计算出供试品中万古霉素B和单个杂质的含量，万古霉素B的含量应不少于93.0%，各单个杂质的含量应不大于4.0%，杂质总量不得大于7.0%。[供试品溶液(a)中峰面积小于对照溶液主峰面积的峰可忽略不计。所有溶液须在配制后4小时内使用。]

公式1：100Ab/(Ab+At/25)

公式2：100（Ai/25）/(Ab+At/25)

式中  Ab为供试品溶液(b)中万古霉素B的峰面积；

At为供试品溶液(a)中各杂质峰面积之和；

Ai为供试品溶液(a)中各杂质峰面积。

 

时间（分钟）           流动相A （%）           流动相B（%）

0                       100                        0

13                      100                        0

22                       0                        100

26                       0                        100

水分  取本品，照水分测定法(中国药典2005年版二部附录Ⅷ M第一法A)测定，含水分不得过5.0%。

不溶性微粒  取本品3瓶，分别加氯化钠注射液10ml，使溶解；待溶液澄清后，依法检查（中国药典2005年版二部附录Ⅸ C），同时做空白试验校正。每个供试品容器中含10µm以上的微粒不得过6000粒，含25µm以上的微粒不得过600粒。

重金属  取本品适量（约相当于70万单位），加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH 3.5）2ml，依法检查(中国药典2005年版二部附录Ⅷ H第一法)，含重金属不得过百万分之三十。

异常毒性  取本品，加氯化钠注射液制成每1ml中含4000单位的溶液，依法检查(中国药典2005年版二部附录Ⅺ C)，按静脉注射法给药，应符合规定。

细菌内毒素  取本品，依法检查(中国药典2005年版二部附录Ⅺ E)，每1000万古霉素单位中含内毒素的量应小于0.25EU。

无菌  取本品，用适宜溶剂溶解后，转移至不少于500ml的0.9%无菌氯化钠溶液中，用薄膜过滤法处理后，依法检查(中国药典2005年版二部附录Ⅺ H)，应符合规定。

其他  应符合注射剂项下有关的各项规定（中国药典2005年版二部附录ⅠB）。

【含量测定】  取装量差异项下的内容物，精密称取适量，用灭菌水定量制成每1ml中约含1000万古霉素单位的溶液，照抗生素微生物检定法(中国药典2005年版二部附录Ⅺ A)测定。检定菌为枯草芽孢杆菌［CMCC（B）63501］；培养基为抗生素Ⅷ号（pH6.0）培养基；缓冲液为pH6.0磷酸盐缓冲液；抗生素浓度范围为2.5～12.5单位/ml，培养温度为35℃～37℃，培养时间为14～16小时。

【类别】  同盐酸万古霉素。

【规格】  50万单位

【贮藏】  密闭，30℃以下保存。